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酶切体系

体系不管多大,都有相应的buffer,只要将buffer变为1X工作浓度就行了,两个同时切的话,需要注意酶的量,看单位是多少,一般是1ul的酶切1ug的质粒或者其它DNA序列,尽量酶的体积不能超过体系的10%,因为里面含有甘油,可能会影响酶切效率。

双酶切反应 (Double Digests) 1、同步双酶切 同步双酶切是一种省时省力的常用方法.选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步.NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性.NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活...

在进行PCR扩增时候,给引物两端设计好酶切位点,一般说来,限制酶的 选择非常重要,尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶,如BamHI,HindIII,提前看好各公司的双切酶所用公用的BUFFER,以及各酶在公用BUFFER里的效率。选好酶切位点后,在...

看你的目的是什么,如果是为了做个酶切鉴定,10微升就足够了,如果是想回收片段,那体系就大点(当然了,要考虑DNA的浓度)。 一般做酶切,DNA回收实验,我一般用50微的体系,仅供参考。。。

同比例缩小即可。DNA的量是3.5微升。

我们平时所用的酶试剂中都含有一定量的甘油,用量过多容易使酶产生星号活性,即限制性酶的特异性会受影响.

AFLP(amplifiedfragment length polymorphism,扩增片段长度多态性)是由荷兰科学家Vos和Zabeau发明的一种十分有效的分子标记技术。其基本原理是:基因组DNA经两种限制性内切酶酶切,形成分子量大小不等的限制性酶切片段,然后把酶切片段与有共...

1. NEB 酶为限制性内切酶,对目的片段特异性序列进行识别与酶切; 2. Buffer的作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。

1.是2*10 2.分别是50/10=5,50/5=10,50/2=25。 一般来说几×就是对buffer稀释几倍。

这个没有特别的规定吧,你是酶切鉴定,还是酶切质粒得到目的片段?对于10ul的酶切体系我们一般加入2ul质粒,大概是400ng左右。

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